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宁波牙科医院 大鼠 创伤 牙槽骨 基因 差异 探讨 常规饮食24h后,腹腔注射水合氯醛,拔除双侧第一磨牙,刮除牙槽窝牙周膜,取大鼠双侧牙槽骨组织置于液氮中备用。本实验建立了下颌第一磨牙咬合创伤模型。该建模方法对实验动物无损伤,效果良好。从图2可以看出,RT-PCR反应的特异性非常好。通过巨大的信号因子群和复杂的信号,研究咬合创伤早期信号因子的差异表达具有重要意义。芯片杂交实验侧和对照侧共有586个差异表达基因,其中166个得到增强(其中48个显著增强)。通路分析涉及不同的信号通路,主要包括p53信号通路、MAPK信号通路、Wnt信号通路、,等(表。
1、缝隙连接是细胞间直接物质交换的膜通道结构 缝隙连接是细胞间直接物质交换的膜通道结构。广泛存在于骨组织中。缝隙连接在将机械信号转化为生物效应的过程中起着重要作用。应力的机制可能是:当应力作用于牙槽骨时,骨基质中的组织液流动,骨细胞感受到水力学变化,其基因表达水平和活性发生变化并释放一系列细胞因子和蛋白激酶,最终通过信息传递和转导导致骨重塑。实验侧为左侧下颌第一磨牙牙槽骨,对照侧为同一只大鼠对侧下颌第一磨牙牙槽骨。验证结果如图2所示。
2、RT-PCR验证在实验结果中 RT-PCR验证在实验结果中,选择表达显著改变且与成骨相关的代表性BGLAP、alp1和Wnt4因子设计引物(表,肌动蛋白作为内部参考(正向引物:5'-GTACCAGGC-ATTGTGGACA-3',反向引物:5'-CTCCTGC-TGTCCACACC-3')进行RT-PCR验证,实验结果与芯片结果一致(表。初步结果表明,咬合创伤后24小时,牙槽骨吸收相关活动已经开始,主要表现为抑制成骨细胞和破骨细胞,
宁波牙科医院破骨细胞和破骨细胞尚未出现。发现Wnt信号系统在发育和分化过程中起重要作用成骨细胞的分化,可以调节成骨细胞的分化、骨基质的形成和矿化等,影响破骨细胞的发生和骨吸收。
3、探针标记和杂交从双侧牙槽骨组织中获得50个总RNAμg 探针标记和杂交从两侧牙槽骨组织中获得50个总RNAμg。通过反转录合成CDNA。用Klenow酶标记cDNA:Cy3-DCTP标记实验组cDNA,Cy5-DCTP标记对照组cDNA。标记产物用PCNucleospinTractKit纯化,纯化后干燥。最后,对载玻片进行干燥,并使用luxscan10ka双通道激光扫描仪进行扫描。
4、选用山东大学实验动物中心雄性SD大鼠5只 选用山东大学实验动物中心雄性SD大鼠5只,体重g。当细胞受到应力和应变时,借助于细胞膜上分子受体的直接接触,机械信号通过细胞骨架传递到细胞的每个部分,从而改变相应效应分子的激活、合成、分泌和其他功能,触发一系列信号通路,影响细胞的增殖、分裂和运动。
5、结果表明 结果表明,所制备的RNA质量良好,符合实验要求。各信号通路的内部因素通过复杂反馈、负反馈和级联相互影响。
6、形成网络系统并影响骨骼平衡 此外,每条通路之间存在复杂的"串扰"现象,形成网络系统并影响骨骼平衡。Cy5/Cy3
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